Патологическая анатомия / Педиатрия / Патологическая физиология / Оториноларингология / Организация системы здравоохранения / Онкология / Неврология и нейрохирургия / Наследственные, генные болезни / Кожные и венерические болезни / История медицины / Инфекционные заболевания / Иммунология и аллергология / Гематология / Валеология / Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация, первая помощь / Гигиена и санэпидконтроль / Кардиология / Ветеринария / Вирусология / Внутренние болезни / Акушерство и гинекология Медицинска паразитология / Патологична анатомия / Педиатрия / Патологична физиология / Оториноларингология / Организация на здравна система / Онкология / Неврология и неврохирургия / Наследствени, генетични заболявания / Кожни и полово предавани болести / Медицинска история / Инфекциозни заболявания / Имунология и алергология / Хематология / Валеология / Интензивно лечение, анестезиология и интензивни грижи, първа помощ / Хигиена и санитарен и епидемиологичен контрол / Кардиология / Ветеринарна медицина / Вирология / Вътрешна медицина / Акушерство и гинекология
основен
За проекта
Медицински новини
За автори
Лицензирани книги по медицина
<< Предишна Следващ >>

Определяне на резус кръвта

Основни понятия

В човешките еритроцити има 5 основни антигена на резус системата (D, C, c, E, e), от които най-имуногенният е антигенът D - Rh (D). Наличието или отсъствието на този антиген определя резусната принадлежност на кръвта: лица с D-антиген принадлежат към групата на позитивния резус (приблизително 85% от бялата раса); лицата, които не го имат, са Rh-отрицателни (съответно те са около 15%).

Имуногенността на други (незначителни) антигени на Rh системата е значително по-ниска и намалява в серията: c> E> C> e. Определянето на незначителни антигени на резус системата, като правило, се извършва, когато са необходими множество трансфузии, в случаите, когато в серума на реципиента се откриват имунни антитела към Rh антигени, включително индивидуалната селекция на кръв.

Антиген D има слаби варианти, групирани в групата Dweek (Du), чиято честота в популацията е около 1%. Тези червени кръвни клетки са слабо или изобщо не са аглутинирани от пълни анти-Rh антитела в директна реакция на аглутинация.

Донорите, съдържащи Du, трябва да бъдат класифицирани като Rh-позитивни, защото, първо, преливане на кръвта им с Rh-сенсибилизирани Rh-отрицателни реципиенти може да предизвика тежки реакции на трансфузия и, второ, да предизвика имунен отговор при Rh отрицателни получатели. Следователно кръвта на донора трябва да се изследва за наличието на Du и ако бъде открита, се счита за Rh-положителна.

Реципиентите, съдържащи Du антиген, трябва да бъдат класифицирани като Rh-отрицателни и само Rh-отрицателна кръв трябва да се прелива, тъй като нормалният D антиген може да предизвика имунен отговор при такива хора. Следователно кръвта на реципиентите не е необходима, за да се тества за присъствието на Du.

Принадлежността на резус се определя в реакцията на аглутинация, като се използват моноклонални реагенти или изоимунни анти-резус серуми, предназначени за откриване на Rh (D) антиген в реакцията на директна аглутинация (в равнината и в епруветката; в физиологичен разтвор; в присъствието на усилватели на високо молекулно тегло; с лекувани червени кръвни клетки протеолитични ензими) или в индиректен антиглобулинов тест (индиректен тест на Кумбс). Методът за определяне зависи от класа антитела в реагента: ако в него присъстват пълни антитела (клас IgM), тогава реагентът се използва за определяне на Rh фактора чрез директна аглутинация в физиологична среда; ако съдържа непълни антитела (клас Ig G), тогава той се използва в реакцията на аглутинация в присъствието на подобрители с високо молекулно тегло (албумин, желатин и др.), с червени кръвни клетки, лекувани с протеолитични ензими, в непряк антиглобулинов тест.

Техниката за определяне на резусната принадлежност на кръвта

Реакция на аглутинация в равнина с използване на анти-D моноклонални реагенти (пълни антитела)

Определянето се извършва в стая с добро осветление. Тестът дава най-добри резултати при използване на висока концентрация на червени кръвни клетки и температура около + 37 ° C, така че е препоръчително да се използва загрята плоча. За изследването се използват пълна кръв, промити червени кръвни клетки, червени кръвни клетки в плазма, серум, консервант или физиологичен разтвор.

Процедурата се извършва в следната последователност:

1. Голяма капка (около 0,1 ml) от реагента се прилага върху плаката или таблетката.

2. Наблизо се прилага малка капка (около 0,03 ml) от тестваната кръв (червени кръвни клетки).

3. Реагентът се смесва старателно с кръв с чиста стъклена пръчка.

4. След 10–20 s плаката се люлее леко. Въпреки факта, че през първите 30 секунди се наблюдава ясна аглутинация, резултатите от реакцията трябва да се вземат предвид 3 минути след смесването.

5. Резултатите от реакцията се записват веднага след приключване.

При наличие на аглутинация тестваната кръв се маркира като Rh-положителна, ако аглутинацията отсъства - като Rh-отрицателна. Ако аглутинацията е много по-слаба от наблюдаваната при Rh (D) -позитивни червени кръвни клетки, тестваната кръв принадлежи към подгрупа от слаби Rh-Du антигени. За да се изясни принадлежността на такава кръвна проба към Du група, изследването се провежда с втори реагент, съдържащ IgG (непълни) анти-D антитела (вж. Глава 6.2.2.3).

Реакция на аглутинация при използване на непълни анти-D антитела (IgG) в присъствието на добавки с високо молекулно тегло

Реакцията се провежда или със специално приготвен реагент, който вече съдържа усилвател (универсален реагент с полиглюцин или албумин за равнината), или усилвателят се добавя по време на реакцията (реакция на свързване с желатин in vitro).

Техниката за настройка на реакцията на аглутинация върху равнина не се различава от описаната в глава 6.2.2.1. Все пак универсалните реагенти могат да дадат фалшива положителна реакция с Rh-отрицателни червени кръвни клетки поради съдържащите се в тях вещества с високо молекулно тегло и могат също да причинят аглутинация на червени кръвни клетки, покрити с антитела с различна (не-анти-резус) специфичност. Следователно е необходимо да се провеждат паралелни тестове с контролен разтвор на използвания усилвател, но без анти-0 антитела. Ако контролния разтвор причинява аглутинация на еритроцитите, резултатите от теста не са надеждни и определянето трябва да се повтори с друг реагент, съдържащ пълни IgM антитела (за предпочитане моноклонални).

Реакции на свързване на желатин.
Моноклонални реагенти и стандартен изоимунен серумен антирезус с непълни антитела могат да бъдат използвани за провеждане на този тест.

1. Пипете 1 капка (около 0,05 ml) от тестваната кръв или суспензия на червени кръвни клетки (приблизително 50%) в епруветката.

2. Добавете 2 капки (0,1 ml) от 10% разтвор на желатин, предварително загрят до разреждане при +46 ... + 48 ° C.

3. Добавете 2 капки (0,1 ml) анти-D реагент и разбъркайте.

4. Поставете епруветката във водна баня с температура +46 ... + 48 ° С в продължение на 5-10 минути или в термостат на сух въздух при същата температура в продължение на 30 минути.

5. Добавете 5–8 ml физиологичен разтвор в епруветката и внимателно обърнете епруветката, затворена от запушалката, за разбъркване 1-2 пъти.

6. Определете наличието на аглутинати, като погледнете в епруветката с просто око или през лупа.

7. Незабавно запишете резултатите от определянето.

Желатиновият тест изисква следните контроли:

със стандартни Rh-положителни червени кръвни клетки;

със стандартни Rh отрицателни еритроцити;

с изследваните червени кръвни клетки и желатинов разтвор, но без анти-0 антитела.

При положителен резултат аглутинатите се различават под формата на агрегати с различни размери на прозрачен фон - кръвта е Rh-положителна. При отрицателен резултат в епруветката няма агрегати, но се вижда равномерно оцветена, непрозрачна суспензия на червени кръвни клетки - кръвта е Rh-отрицателна. Ако се наблюдава финозърнеста, съмнителна аглутинация, тогава кръвта трябва да бъде тествана чрез индиректен антиглобулинов тест (виж глава 6.2.2.3). Резултатите от желатинов тест са надеждни само когато самият желатин не предизвиква аглутинация на изследваните червени кръвни клетки и резултатите от контролите със стандартни червени кръвни клетки са както се очаква. В случай на недостатъчни резултати от контрола, определянето на резус принадлежността трябва да се повтори с помощта на друг реагент или проба от желатин. Ако самият желатин причинява аглутинация на изследваните еритроцити, тогава може да се предположи наличието на антиеритроцитни антитела върху тях, анти-резус или друга специфичност (това се наблюдава при хемолитична болест на новороденото, автоимунна хемолитична анемия и някои инфекциозни заболявания). В този случай кръвта трябва да бъде изпратена за изследване в специална серологична лаборатория.

Косвен антиглобулинов тест, използващ непълни анти-0 антитела (IgG)

1. Пригответе 2–5% суспензия от тестови червени кръвни клетки, промити три пъти във физиологичен разтвор. За да направите това, поставете в епруветка 5 капки (около 0,25 ml) от тестваната кръв, промийте три пъти с 5-10 ml физиологичен разтвор; суспендирайте утайката на еритроцитите в 2-3 ml физиологичен разтвор или за предпочитане в 2-3 ml LISS разтвор, в който фиксирането на антитела към червените кръвни клетки е по-силно и по-бързо, отколкото във физиологичен разтвор.

2. Пипетирайте 1 капка анти-0 реагент в чиста етикетирана епруветка.

3. Добавете 1 капка 2–5% суспензия на червените кръвни клетки.

4. Инкубирайте сместа при + 37 ° C в продължение на 30–45 минути (ако червените кръвни клетки се претеглят в физиологичен разтвор) или 10-15 минути (ако червените кръвни клетки се претеглят в LISS).

5. Измийте червените кръвни клетки 1 път (в случай на използване на моноклонален реагент) или 3 пъти (в случай на използване на изоимунен анти-0 серум) с голям обем (5-10 ml) физиологичен разтвор. Еднократното измиване е допустимо само при използване на моноклонални реагенти. Отстранете напълно физиологичния разтвор.

6. Добавете 1 капка антиглобулинов реагент към утайката и разбъркайте добре.

7. Центрофуга за 15–20 s при 2000–3000 rpm.

8. Внимателно ресуспендирайте пелетата и визуално определете наличието на аглутинация.

9. Незабавно запишете резултатите от определянето.

При липса на аглутинация кръвта е Rh отрицателна. С положителна реакция - Rh-положителна; Du подгрупите могат да причинят слаба аглутинация дори при този силно чувствителен тест. Преди да присвоите донора Du на Rh-положителен, заключението трябва да бъде потвърдено чрез контролно изследване на антиглобулинов серум със стандартни червени кръвни клетки. Ако контролният тест е положителен, тълкуването не е надеждно. В този случай реципиентът трябва да получава само Rh-отрицателна кръв (еритроцити), а кръвта на такъв донор не трябва да се използва за трансфузия до окончателното определяне на резус-принадлежността му.

Аглютинация на червени кръвни клетки, лекувани с протеолитични ензими, като се използват непълни анти-0 антитела (IgG)

Непълните антитела могат да причинят директна аглутинация в солевата среда на еритроцитите, третирани с бромелин, папаин, трипсин и други протеази. Този метод е силно чувствителен и надежден при откриване на слаби форми на D-антиген. Използва се главно за автоматично определяне на кръвни групи в Gruppomatic системи, които осигуряват стандартното третиране на червените кръвни клетки с ензими и подбират правилното разреждане на реагента, тъй като прозоновият феномен (инхибиране на аглутинация от излишните антитела) е характерен за този тест.

С автоматично определяне на кръвните групи методът може да се използва в специализирани серологични лаборатории.
<< Предишна Следващ >>
= Преминете към съдържанието на учебника =

Определяне на резус кръвта

  1. Резус-кръвна система и нейното значение за развитието на изозерологична несъвместимост на кръвта на майката и плода
    Изосерологичната несъвместимост на кръвта на майката и плода най-често се проявява в резултат на резус конфликта, когато кръвта на майката е Rh-отрицателна, а кръвта на плода е Rh-положителна. Системата Rh фактор (Rh) се състои от различни антигени RhD, RhC, RhE. Има разновидности на Hr c, d, e, които имат шест основни типа (алели) антигени на Rh фактор. Те имат
  2. V Въпрос за резус фактор на кръвта
    В наши дни мнозина са наясно с наличието на Rh-отрицателен и Rh-положителен фактор. Известно е също, че принадлежността на жената към първия вариант може да усложни бременността. Естествено, желанието да се защитят от влиянието на този много фактор. Не бе открит протеин.Резусната система се свързва с наличието на специфични протеини в кръвта (като част от червените кръвни клетки). 85% от хората имат тези протеини - своите
  3. ОПРЕДЕЛЯНЕ НА СПЕЦИАЛНИТЕ АКСЕСОАРИ НА ЖИВОТНО И ПТИЧНО МЕСО
    Видовете месо от домашни, диви животни и домашни птици са установени за решаване на въпроси, свързани с съдебно-ветеринарна експертиза в случаите на заместване на месо помежду си (фалшификация), бракониерство, кражба. Има ориентировъчен и надежден (точен) метод] за определяне на видовете месо. Ориентировъчни са: точка на топене и твърдост на мазнините
  4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НА СПЕЦИАЛНИ АКСЕСОАРИ ЗА МЕСО
    ИДЕНТИФИКАЦИЯ НА СПЕЦИАЛНИТЕ АКСЕСОАРИ
  5. Мутагенеза въз основа на фактори на кръвни групи и резус система
    Най-опасната последица от заразяване на кръвни групи и вируси на Rh фактор е последваща мутагенеза (процесът на наследствени промени - мутации, причинени от мутагени), водещи до генетични промени в тялото на пациента. Механизмът на мутагенеза, причинена от вируси (антигени) на кръвни групи и Rh фактор, не е проучен, тъй като по-рано се смяташе, че системите на кръвните групи и
  6. Кръвни групи и Rh фактор
    Откриването на кръвни групи от Карл Ландщайнер е едно от най-известните открития в хематологията. Не всички обаче знаят историята на това откритие. Така през 1900 г. австрийският имунолог Карл Ландщайнер, изучавайки свойствата на кръвта, смесените червени кръвни клетки и кръвни серуми, взети от различни хора. В някои случаи, когато се добавя чужд серум, червените кръвни клетки се слепват. Ландщайнер определи, че в
  7. Сравнителен анализ на механизмите на действие на системата от кръвни групи в резус и вируса на СПИН
    През 2004 г. британските учени разработиха техниката на операции върху ембриони. В своите експерименти изследователите са работили с мишки, които са били в състояние да насаждат определени гени преди раждането. Неутрализираният вирус на СПИН се използва като инструмент, с който изследователите вмъкват ДНК в генома на мишката. Вместо да повреди имунната система, вирусът зарази ембриона с "лечебни" гени. сходен
  8. Проблем 42. ИЗОСЕРОЛОГИЧНА несъвместимост на кръвта на матката и плода от реактивния фактор
    Бременната К., на 25 години, се обърна към предродилната клиника на 30 март за бременността. От анамнезата. Менархе от 13-годишна възраст, установена веднага, редовна, 5 дни, 23 дни по-късно. Последна менструация 24-28 декември, Сексуален живот от 19 години. Първата и втората бременност приключиха с раждането, децата починаха антенатално от хемолитичната болест на плода. Тази бременност е третата, желана, през
  9. ИЗОСЕРОЛОГИЧНА несъвместимост на КРЪВАТА НА МАЙКА И ПЛОДОВЕ ОТ РЕЗУЛТАТЕН ФАКТОР
    ИЗОСЕРОЛОГИЧНА несъвместимост на КРЪВАТА НА МАЙКА И ПЛОДА
  10. Кръвна доставка в клиничната диагностична лаборатория за определяне на електролити, кръвни газове и хемостаза
    Правила за подготовка на субекти, вземане и съхранение и доставка на материал за изследване в CDL Изследване на киселинно-алкално равновесие и кръвни газове Артериалната и артериализирана капилярна кръв се предпочитат като биоматериал за определяне на киселинно-алкално равновесие и кръвни газове. Материалът трябва да се вземе при анаеробни условия, за да се изключи обмяната на газ
  11. Методи за групиране на кръвта
    Използване на стандартни серуми. За определяне на кръвните групи съгласно системата AB0, използвайки стандартни серуми, се използват серуми от I, II, III групи от две серии. Реакцията се провежда при стайна температура. Съотношението на серума и червените кръвни клетки е 10: 1. Графологична структура 2. Получаване на стандартни серуми {foto13} {foto14} "-" - липса на аглутинация, "+" - аглутинация.
  12. Определяне на кръвния тип
    През 1901г Landsteiner - кръвта на хората е разнородна. ABC - групи. През 1907г - Ian Smith - + I gr. Кр. Кръвна група - комбинация от антигенни свойства на червените кръвни клетки, наречени аглутиногени и антитела във връзка с тях, разположени в кръвната плазма. В зависимост от комбинацията на Ar и At, кръвна група. Буквено-цифрова класификация: O (I), A (II), B (III), AB (IV). Пълно: Oh ?? A?, B?, AB0.
  13. Определяне на кръвна група според системата AB0
    Определянето на кръвната група е проста, но много отговорна процедура. Затова лекарят трябва да следи за правилността на изследването и да оценява резултатите от него. Кръвната група в системата AB0 се определя чрез изследване на червените кръвни клетки на индивида при реакции на хемаглутинация с анти-А и анти-В серуми. Резултатите от тази реакция обикновено се потвърждават чрез откриване на "нормални" анти-А- и
  14. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НА КРЪВНИ ГРУПИ
    ИДЕНТИФИКАЦИЯ НА ГРУПИ
  15. Определяне съдържанието на важни елементи в кръвта
    Западната медицина предлага редица инструменти за подпомагане поддържането и подобряването на резултатите след програмата. Използвайте ги - те могат да бъдат безценни, защото ще ви избавят от ненужното страдание. Като кардиолог, високо ценя кръвните изследвания, тъй като те ви позволяват да идентифицирате пречките и недостатъците в тялото на пациента на ранен етап, които, ако не
  16. ОПРЕДЕЛЯНЕ НА КОЛИЧЕСТВОТО НА КРЪВ И ОБЕМ (КАПАЦИТЕТ) НА СЪРЦЕВА КАВИТА
    В някои случаи (хипертония, плетор) може да се наложи да се определи общата кръв на трупа. Технически обаче е много трудно да се приложи. Следователно 3. I. Morgenstern и V. A. Mihahailovsky (1947) предложиха да се измери обемът на кръвта само на кухините на сърцето и основните съдове, които са най-близо до него: аортата, белодробната артерия, вена кава и белодробните вени. Въпреки че този метод дава само много приблизителна идея
Медицински портал "MedguideBook" © 2014-2019
info@medicine-guidebook.com